DdNTP-lərdən istifadənin məqsədi nədir?
DdNTP-lərdən istifadənin məqsədi nədir?

Video: DdNTP-lərdən istifadənin məqsədi nədir?

Video: DdNTP-lərdən istifadənin məqsədi nədir?
Video: 7.1 Sanger Sequencing using Dideoxyribonucleic Acid Nucleotides (ddNTPs) 2024, Aprel
Anonim

DdNTP istinad edir Dideoksinukleotidlər DNT ardıcıllığı üçün müxtəlif uzunluqlarda DNT zəncirləri istehsal etmək üçün Sanger dideoksi metodunda istifadə olunan trifosfatlar. Bu, DNT polimerləşməsi (və ya DNT uzanması) prosesinin dayandırılması ilə nəticələnir, çünki bu prosesin davam etməsi üçün 3'-OH qrupu lazımdır.

Beləliklə, niyə ddNTP-lər ardıcıllıqla istifadə olunur?

Dideoksinukleotidlər DNT polimerazanın zənciri uzanan inhibitorlarıdır, istifadə olunur DNT üçün Sanger metodunda ardıcıllıq . Dideoksiribonukleotidlərin 3' hidroksil qrupu yoxdur, buna görə də bu dideoksinukleotid zəncirdə olduqdan sonra zəncir uzanması baş verə bilməz. Bu, DNT-nin dayandırılmasına səbəb ola bilər ardıcıllıq.

Eynilə, ddNTP-lər dNTP-lərə qoşulurmu? Bir və ya daha çox dNTP-lər replikasiya məhsullarının vizuallaşdırılmasına kömək etmək üçün radioaktiv olaraq etiketlənmişdir. Nəhayət, hər boru adlanan dörd xüsusi nukleotiddən birini alır dideoksinukleotidlər ( ddNTP-lər ). Bununla birlikdə, DNT polimeraza daxil olduqdan sonra zənciri daha da genişləndirə bilməz, çünki ona 3'-OH lazımdır. qoşmaq növbəti nukleotidə keçir.

Eynilə soruşa bilərsiniz ki, ddNTP-lər ardıcıllıq reaksiyasını necə dayandırır?

Kiçik miqdarda olduqda reaksiyaların ardıcıllığı , dideoksiribonukleozid trifosfatlar ( ddNTP-lər ) dayandırın ardıcıllıq reaksiyası artan DNT zəncirlərində müxtəlif mövqelərdə. ddNTP-lər ardıcıllıq reaksiyasını dayandırır çünki onlar: DNT polimerazanın şablon zəncirindən düşməsinə səbəb olur. c.

Dideoksinukleotidləri əhatə edən hansı texnika istifadə edilə bilər?

Sanger ardıcıllığı a üsul zənciri bitirmənin seçici birləşməsinə əsaslanan DNT ardıcıllığının dideoksinukleotidlər in vitro DNT replikasiyası zamanı DNT polimeraza ilə. 1977-ci ildə Frederik Sanger və həmkarları tərəfindən hazırlanmış, ən geniş yayılmış istifadə olunur ardıcıllıq üsul təxminən 40 ildir.

Tövsiyə: