Nə üçün sekvensiyadan əvvəl PCR məhsullarını təmizləmək lazımdır?

2024 Müəllif: Stanley Ellington | [email protected]. Son dəyişdirildi: 2023-12-16 00:13

İstədiyinizin yoxlanılması məhsul edir vacibdir , qeyri-spesifik çatışmazlığının təsdiqlənməsi daxildir məhsullar və primer dimerlər. Təmiz -up reaksiya qarışığı da var zəruri sonrakı reaksiyalara mane ola biləcək və oxunmaz ardıcıllığa gətirib çıxara bilən korporativ olmayan primerləri və dNTP-ləri çıxarmaq.

Bundan başqa, nə üçün PZR məhsullarını təmizləmək lazımdır?

Sənin ehtiyacın var PCR məhsullarını təmizləyin bağlanma müvəffəqiyyətini optimallaşdırmaq üçün istifadə olunmamış primerlərdən, nukleotidlərdən və fermentlərdən xilas olmaq, məhsul of PCR . Kimə saflaşdırmaq the PCR məhsulları , ölçüsü istisna xromatoqrafiyasından istifadə olunur.

Biri də soruşa bilər ki, endonükleaz həzmini məhdudlaşdırmadan əvvəl PCR məhsullarını təmizləməlisiniz? Əksəriyyəti məhdudiyyət fermentlər aktivdir PCR tamponlar. Klonlaşdırma proqramları üçün, təmizlənmə of Həzmdən əvvəl PCR məhsulları edir zəruri tərkibində mövcud olan aktiv termofilik DNT polimerazanı çıxarmaq PCR qarışıq. DNT polimerazları parçalanmış DNT-nin uclarını dəyişdirə və bağlanma məhsuldarlığını azalda bilər.

İnsanlar da soruşurlar ki, sekvensiya üçün PCR məhsullarını necə hazırlayırsınız?

PCR məhsullarının birbaşa ardıcıllığı

1. Düzgün fraqmenti gücləndirdiyinizə əmin olun.
2. Siz bütün qalıq PCR primerlərini və korporasiya olunmamış nukleotidləri çıxarmalısınız.
3. Əgər PCR primerləri də ardıcıllıq primer(ləri) olacaqsa, onların şərtlərimizə uyğun olduğundan əmin olun.
4. Nümunəni həddindən artıq cəmləməyin!

Siz PCR məhsulunu sıralaya bilərsinizmi?

Birbaşa Sıralama of PCR məhsulları . Sıralama yalnız istifadə edir bir iki yerinə astar istifadə olunur PCR . Əgər etsən hər iki primeri çıxarmayın, Sən … əcəksən iki almaq ardıcıllıqlar oxunmayan bir-birinin üstünə qoyulur. a istifadə etmək yaxşıdır PCR üçün primer ardıcıllıq şərtlərimizə uyğun gələnə qədər.