Gel elektroforezi apararkən məhdudlaşdırıcı fermentlərdən necə istifadə olunur?
Gel elektroforezi apararkən məhdudlaşdırıcı fermentlərdən necə istifadə olunur?

Video: Gel elektroforezi apararkən məhdudlaşdırıcı fermentlərdən necə istifadə olunur?

Video: Gel elektroforezi apararkən məhdudlaşdırıcı fermentlərdən necə istifadə olunur?
Video: Gel elektroforez | Biotexnologiya | Biologiya 2024, Noyabr
Anonim

1 Cavab. DNT, RNT və ya plazmidi kəsmək üçün məhdudiyyət saytlar (EcoRI, BamHI, hindIII və BglII kimi) ayrıla bilən və beləliklə istifadə edərək xarakterizə edilə bilən daha kiçik genetik fraqmentlər yaratmaq üçün gel elektroforezi.

Eynilə soruşa bilərsiniz ki, məhdudlaşdırıcı fermentlərin rolu nədir?

A məhdudlaşdırıcı ferment spesifik, qısa nukleotid ardıcıllığını tanıyan və DNT-ni yalnız həmin xüsusi yerdə kəsən zülaldır. məhdudiyyət sayt və ya hədəf ardıcıllığı. Canlı bakteriyalarda, məhdudlaşdırıcı fermentlər fəaliyyət göstərir Hüceyrəni viral bakteriofaqlara qarşı müdafiə etmək.

Həmçinin, hansı məhdudlaşdırıcı fermentdən istifadə edəcəyinizi necə bilirsiniz? Məhdudiyyət fermentlərini seçərkən, aşağıdakı fermentləri seçmək istərdiniz:

  1. Vuruşunuzu yan tərəfə qoyun, lakin içəridən kəsməyin.
  2. Alıcı plazmidinizdə istədiyiniz yerdə (adətən Çoxlu Klonlama Saytında (MCS)), lakin plazmidin başqa yerində kəsməyin.

Bundan əlavə, tədqiqatda məhdudlaşdırıcı fermentlərdən necə istifadə olunur?

Laboratoriyada, məhdudlaşdırıcı fermentlər (və ya məhdudlaşdırıcı endonükleazlar ) var istifadə olunur DNT-ni daha kiçik parçalara ayırmaq. Kəsiklər həmişə xüsusi nukleotid ardıcıllığında aparılır. Fərqli məhdudlaşdırıcı fermentlər müxtəlif DNT ardıcıllığını tanıyır və kəsir.

Gel elektroforezinin rolu nədir?

Gel elektroforezi DNT fraqmentlərini ölçülərinə görə ayırmaq üçün istifadə edilən bir texnikadır. DNT nümunələri bir ucundakı quyulara (girintilərə) yüklənir gel , və onları çəkmək üçün elektrik cərəyanı tətbiq olunur gel . DNT fraqmentləri mənfi yüklüdür, ona görə də müsbət elektroda doğru hərəkət edirlər.

Tövsiyə: